体内蛋白质怎么检测?如何检测蛋白质?
体内蛋白质怎么检测?
蛋白质是构成人体各个器官的重要基本元素之一,蛋白质对于人体来说是非常重要的。其的含量在人体内不能过多,也不能过少,因为不论过多过少,都会对人体造成不一样的病变。人体一直从食物中源源不断地补充蛋白质,也一直在肝脏中生成蛋白质,这样才能够维持人体一个正常的生理功能。蛋白质的检测能够准确地反映出人体内蛋白质的含量,也能反映出一个人的健康程度。那么蛋白质的检测方法有些什么呢?我们不妨尝试一下以下的一些方法。
双缩脲法是检测蛋白质的一个比较简单的方法。这种检测方法的灵敏度比较低一点,但是速度却比较快,一般用20到30分钟的时间就能够有效地检测出人体内蛋白质的含量了。不过通过双缩脲法只能够检测出蛋白质含量多少,并不能够清楚的判断出是哪种蛋白质。因为这种方法检测的时候不同蛋白质的显色程度是相似的,所以就很难辨别了。
紫外线吸收法是一种很灵敏的用来检测蛋白质的方法,一般只需要五分钟到十分钟的时间就能够有效的检测出来了。蛋白质中独特的酪氨酸以及色氨酸能够在紫外线长度280纳米的地方出现光吸收。所以我们只需要观察在紫外线长度280纳米的地方出现的光吸收含量就能够有效的推测出人体内的蛋白质含量了。
考马斯亮蓝法在检测蛋白质的过程中是灵敏度最高的一种,并且检测时间也非常的短暂,只需要五到15分钟的时间就能够准确的检测出来了。考马斯亮蓝染料在与人体蛋白质结合的过程中,会出现非常特异的变化,从而让大家判断出蛋白质的含量。
硫酸铜法传统的用于检测人体蛋白质的方法,具体的检测过程如下。首先取0.2克的硫酸铜以及6克的硫酸钾,然后将适量的蛋白质用滤纸包裹好后,加入20ml的硫酸。然后在电炉子上进行融化,等到蛋白质中没有任何碳化颗粒,并且处于澄清状态下的时候在拿下来晾冷。再加入过氧化氢,直到把瓶中的蛋白质冲洗干净为止,再继续消化30分钟,就能够判断出人体的蛋白质了。
如何检测蛋白质
鉴定蛋白质可以用双缩脲试剂。
双缩脲(NH2CONHCONH2)由两个分子脲经180℃左右加热,放出一个分子氨后得到的产物,在强碱性溶液中,双缩脲与CuSO4形成紫色络合物,双缩脲反应产生的紫色络合物颜色的深浅与蛋白质浓度成正比,而与蛋白质分子量及氨基酸成分无关,故可用来测定蛋白质含量。
优点:双缩脲法测定蛋白质的测定范围是1~10mg蛋白质,操作简单、快捷。既适合手工操作,又适合自动化分析,重复性好、线性关系好, 双缩脲试剂可以长期保存( 若贮存瓶中有黑色沉淀出现,则需要重新配制)。
缺点:灵敏度差,测定范围窄,样品需要量大,不同的蛋白质产生颜色的深浅相近,因此它常用于需要快速,但并不需要十分精确的蛋白质测定。 干扰测定的物质包括有:在性质上是氨基酸或肽的缓冲液,如TrIs缓冲液,因为它们产生阳性呈色反应,铜离子也容易被还原,有时出现红色沉淀。